北京索莱宝科技有限公司 张净花 010-56371206


C8062 鼠尾胶原蛋白I型 solarbio 的使用说明
货号：C8062
保存：4℃保存，切勿冻存，有效期为一年。
规格：10mg, 5mg/ml, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。
C8062 鼠尾胶原蛋白I型 solarbio 的产品简介：
索莱宝鼠尾胶原蛋白 I型(rattailtendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen的方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境，使细胞在三维环境中生长。
1，在使用索莱宝鼠胶原蛋白I型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
2，在 1mg/ml浓度以上，pH为7左右时可形成具有一定强度的三维胶，检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。
C8062 鼠尾胶原蛋白I型 solarbio 的使用方法：
1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm2
以包被浓度为 2 ug/cm2 为例：用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。
按以下表格体积加到相应的培养器皿中：


            

    

        

            

            
 
            
            

            

            
            

            
表面积（cm2每孔或每皿）
            
            
            

            

            
            

            
加入0.012mg/ml的胶原的体积（ul）
            
        
        

            

            
96孔细胞培养板
            
            

            
0.3
            
            

            
50
            
        
        

            

            
24孔细胞培养板
            
            

            
1.9
            
            

            
300
            
        
        

            

            
12孔细胞培养板
            
            

            
3.8
            
            

            
600
            
        
        

            

            
6孔细胞培养板
            
            

            
9.5
            
            

            
1580
            
        
        

            

            
35mm细胞培养皿
            
            

            
8
            
            

            
1330
            
        
        

            

            
60mm细胞培养皿
            
            

            
21
            
            

            
3500
            
        
        

            

            
100mm细胞培养皿
            
            

            
55
            
            

            
9170
            
        
    


确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置 1小时后，用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。
2、三维胶原的制备
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06×体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。
需要的溶液（均需要无菌、预冷）：10×PBS（可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示）或 10×培养液 ，, 0.1mol/L NaOH，0.1mol/L 乙酸(一般不用)，双蒸水
A． 不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10×PBS
或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
B．含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。
C8062 鼠尾胶原蛋白I型 solarbio 的注意事项：
鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。
 
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与C8062 鼠尾胶原蛋白I型 solarbio 相关的产品

C5062 	 Rat tail tendon collagen type I鼠尾胶原蛋白I型	solarbio 	10mg/2ml （5mg/ml）
C8060	Collagen TypeⅠ  胶原蛋白Ⅰ型	Sigma	1g
C8061	Collagen TypeⅠ  胶原蛋白Ⅰ型(可溶）	国产	1G
C7806	Collagen TypeII 胶原蛋白II型	Sigma	2mg
C8340	4-Chloro-1 Naphthol  4-氯－1－萘酚(4ClN)	Amresco	5g
C8070	Catalase   过氧化氢酶（牛肝）	Sigma	1g
C8080	Cytochalasin B  细胞松弛素B	Sigma	1mg
 C8650	Cyclophosphamide monohydrate环磷酰胺	Sigma	1g
C8100	DRISELASW 崩溃酶	Sigma	500mg
C8110	ConA Type A IV 刀豆蛋白A IV	Sigma	25mg
C8120	Cytochromes C  细胞色素C(马心)	Sigma	25mg
C8130	Cytochromes C  细胞色素C（牛心）  	Sigma	25mg
TEVDAB-1000U	TEV蛋白酶	solarbio	1000u
C8140	CollagenaseⅠ  胶原酶Ⅰ	Sigma	100mg
C8150	CollagenaseⅡ  胶原酶Ⅱ	Sigma	100mg
C8490	CollagenaseIII 胶原III	进口分装	100mg
C8160	CollagenaseⅣ  胶原酶Ⅳ	Sigma	100mg
C8170	CollagenaseⅤ  胶原酶Ⅴ	Sigma	100mg
	CollagenaseⅠ  胶原酶Ⅰ	gibco原装	1g 
	CollagenaseⅡ  胶原酶Ⅱ	gibco原装	1g 
	CollagenaseⅣ  胶原酶Ⅳ	gibco原装	1g 
C8180	Chitin 几丁质	Sigma	10g
C8350	Cellulose DE-52   纤维素 DE-52	Whatman	100g
C8930	Cellulose DE-52   纤维素 DE-52	国产	100g
D8900	Cellulose DE-32 纤维素 DE-32TUNEology 波长可调检测卡盒-->